شته خالدار یونجه با نام علمی Therioaphis trifolii Buckten از جمله آفات مهم یونجه می باشد. به منظور بررسی تنوع ژنتیکی این شته، نمونه برداری از مزارع یونجه 10 استان کشور صورت گرفت چکیده : شته خالدار یونجه با نام علمی Therioaphis trifolii Buckten از جمله آفات مهم یونجه می باشد. به منظور بررسی تنوع ژنتیکی این شته، نمونه برداری از مزارع یونجه 10 استان کشور صورت گرفت. نمونه ها تا رسیدن به آزمایشگاه درون ازت مایع قرار گرفتند و سپس به فریزر با دمای 80- درجه سلسیوس منتقل شدند. استخراج DNA از نمونه های جمع آوری شده به روش دلاپور تا با اندکی تغییرات توسط کوماتسودا انجام و غلظت DNA های بدست آمده به وسیله دستگاه اسپکتروفتومتر اندازه گیری و غلظت همه نمونه ها به میزان 50 نانوگرم بر میکرولیتر یکسان شد.آزمون PCR بر روی این DNAها صورت گرفت. سپس الکتروفوزر بر روی ژل آگارز 1% انجام گرفت. در آزمون RAPD-PCR از 7 آغازگر تصادفی استفاده شد. در مجموع این آغازگر ها در محدوده 200-4000 bp ، 88 باند دیده شد. سپس با استفاده از باندهای به دست آمده از تمامی آغازگرها، به وسیله روش UPGMA درخت فیلوژنی نمونه ها رسم گردید که شامل سه کلاستر بوده که کلاستر دوم خود شامل دو ساب کلاستر است. در آزمون rep-PCR از آغازگرهای BOX ، ERIC و REP استفاده شد. در مجموع در محدوده 100-3500 bp ، 53 باند دیده شد. سپس درخت فیلوژنی مرکب از داده های سه آغازگر با روش ذکر شده رسم گردید که شامل یک کلاستر کلی بود و نمونه های منطقه خبر به صورت یک فرد مشاهده شد. در این پژوهش بین نمونه های جمع آوری شده از مناطق مختلف از نظر ژنتیکی تفاوت وجود داشت اما ارتباطی بین این تفاوت و اختلاف ارتفاع از سطح دریا و طول و عرض جغرافیایی و موقعیت قرار گرفتن اراضی مشاهده نگردید. دانلود فایل